Определение диазинона и дурсбана в молоке и тканях животных газожидкостной хроматографией
Определение диазинона и дурсбана в молоке и тканях животных газожидкостной хроматографией
Диазинон [0,0-диэтил-0-(2-изопропил-4-метилпиримидил-6)-тиофосфат] и дурсбан (0,0-диэтил-0-3,5,6-трихлорпиридилтиофосфат) являются производными тиофосфорной кислоты. В чистом виде диазинон - бесцветное масло с температурой кипения 89 °С при 0,1 мм рт.ст. Растворимость диазинона в воде при 20 °С 40 мг/л. Дурсбан - белое кристаллическое вещество с температурой плавления 41,5-43,0 °С. Оба пестицида хорошо растворяются в большинстве органических растворителей.
Принцип метода. Метод* основан на определении диазинона и дурсбана в экстрактах исследуемых проб на хроматографе с термоионным детектором. Чувствительность метода 0,05 нг диазинона и 0,1 нг дурсбана в пробе, вводимой в хроматограф. Полнота определения препаратов 70-80%.
________________
* Г.А.Таланов, В.В.Лещев (ВНИИВС).
Реактивы и растворы
Ацетон х.ч.
-Гексан.
Спирт этиловый гидролизный.
Стандартные растворы диазинона и дурсбана и гексане (1 мкг/мл).
Приборы и посуда
Хроматограф "Цвет 5" или другой марки с термоионным детектором.
Колонки стеклянные 1000х3 мм.
Неподвижная фаза метилсилоксан SE-30 (5%). Твердый носитель - силанизированный хромосорб W (80-100 меш).
Микрошприц на 10 мкл.
Бюксы на 15-20 мл.
Цилиндры мерные на 50 мл.
Делительные воронки на 100 мл.
Воронки диаметром 5 см.
Пробирки на 10 мл градуированные с притертой пробкой.
Ход анализа. Экстракция препаратов из пробы. 5 мл молока или 5 г измельченной или гомогенизированной ткани животного помещают в бюкс, заливают 10 мл ацетона или этилового спирта, размешивают стеклянной палочкой и ставят в холодильник на 1 ч. Затем пробу фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку. Бюкс промывают 10 мл ацетона или спирта, пропуская растворитель через тот же фильтр в делительную воронку. Фильтр промывают 5 мл дистиллированной воды. Затем в делительную воронку с экстрактом наливают 25 мл дистиллированной воды, воронку встряхивают, добавляют в нее 10 мл гексана, еще раз встряхивают 1-2 мин.
После разделения жидкостей верхний гексановый слой сливают в градуированную пробирку с притертой пробкой, в которую предварительно насыпают 100-150 мг безводного сернокислого натрия. При плохом разделении водного и гексанового слоев по каплям добавляют спирт, осторожно вращая делительную воронку. Объем гексанового экстракта в пробирке доводят до 10 мл тем же растворителем. Аликвотную часть вводят в хроматограф.
Условия хроматографирования
Шкала электрометра 2,5·10
А. Скорость протяжки бумаги 1 см/мин. Температура колонки 190, испарителя 220 °С. Вводимый объем 2-5 мкл. Расход газов: азота 22-24 мл/мин, водорода 12-17 мл/мин, воздуха 400 мл/мин. При указанных условиях чувствительность для диазинона 0,05 нг при высоте пика 12 мм, для дурсбана 0,1 нг при высоте пика 10 мм. Время удерживания диазинона 2,2 мин, дурсбана 4,4 мин.
Количественное определение проводят путем сравнения высот или площадей пиков исследуемого вещества экстракта и стандартного раствора. Формулы расчета приведены.
или 
,
где 
- количество препарата, мг/л или мг/кг;
- количество препарата в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг;
- площадь пика стандартного раствора препарата, введенного в хроматограф, мм
;
- высота пика стандартного раствора, введенного в хроматограф, мм;
- площадь пика препарата в пробе, мм;
- высота пика препарата в пробе, мм;
- объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;
- общий объем экстракта после упаривания, мл;
- масса или объем анализируемой пробы, мл или г.
,
где - содержание пестицида в пробе, мг/кг или мг/л;
- количество пестицида, найденное по калибровочному графику, нг;
- конечный объем раствора, из которого отбирают аликвоту для хроматографирования, мл;
- объем аликвоты, вводимый в хроматограф, мкл;
- масса или объем анализируемой пробы, г или мл.
Сборник методических документов,
необходимых для обеспечения применения
Федерального закона от 12.06.08 N 88-ФЗ
"Технический регламент на молоко
и молочную продукцию". Часть 7. -
М.: Федеральный центр гигиены
и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009