Временные методические указания по определению остаточных количеств имазетапира в сое, горохе, сырье лекарственных культур, почве, воде методом тонкослойной хроматографии

     2.1*. Основные положения

________________

* Нумерация соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

     2.2. Реактивы и растворы

Ацетон, х.ч., ГОСТ 22300-76.

Хлороформ, х.ч., ГОСТ 22300-76, перегнанный.

Имазетапир, ан. станд., фирма Цианамид.

н-Гексан, ч.д.а., ТУ 6-09-3375-78*.

________________

* ТУ, упомянутые здесь и далее по тексту, не приводятся. За дополнительной информацией обратитесь по ссылке. - Примечание изготовителя базы данных.

Сульфат натрия, х.ч., ТУ 6-09-3675-74, безводный.

Соляная кислота, ч., ГОСТ 3118-77.

О-толидин, ТУ 6-09-2223-75.

Этиловый спирт, ректиф. ГОСТ 5962-67.

Уксусная кислота, ч., ГОСТ 18270-72, ледяная.

Перманганат калия, ГОСТ 20490-75.

Четыреххлористый углерод.

Йодид калия, ч., ГОСТ 4222-74*.

________________

* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 4232-74. - Примечание изготовителя базы данных.

Серная кислота.

Азотнокислое серебро, ч.д.а., ГОСТ 1277-81*.

________________

* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 1277-75. - Примечание изготовителя базы данных.

Бромфеноловый синий, ч.д.а., ТУ 6-09-113-2.

Проявляющие реагенты: I. Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и прибавляют 1 г йодида калия. Раствор хранят в темной склянке. Годен к употреблению в течение длительного времени. II. 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят до 100 мл 1% раствором нитрата серебра в водном ацетоне (ацетон:вода, 3:1).

Экстрагирующая смесь: 1 часть 1М HCl, 39 частей HO и 60 частей этанола.

Стандартные растворы имазетапира в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл и 10 мкг/мл.

     2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М ТУ 11-97-76.

Лампа УФ света МРТУ 42-1618.

Хроматографическая камера с пришлифованной крышкой.

Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, вместимостью 500 мл, 250 мл.

Пульверизаторы стеклянные.

Чашки Петри, ГОСТ 25336-82.

Эксикатор, ГОСТ 25336-82.

Пипетки градуированные, ГОСТ 20292-74 на 10, 1 и 0,1 мл.

Градуированные пробирки, ГОСТ 1770-74, с пробками на шлифах вместимостью 10 мл.

Колбы плоскодонные, ГОСТ 25335-82*, вместимостью 500 и 250 мл.

________________

* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 25336-82. - Примечание изготовителя базы данных.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 и 25 мл.

Микрошприцы на 100 мкл, ГОСТ 20292.

Почвенное сито.

Хроматографические пластинки "Silufol, Чехословакия.

Хроматографические пластинки "Сорбфил", ТУ 26-11-17-89 ПКБ Пластмаш, МВС АН России г.Краснодар.

Зерновая мельница или кофемолка.

     2.4. Подготовка к определению

     2.5. Отбор проб

Отбор проб для проведения определения проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов внешней среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21 августа 1979 года N 2051-79.

     2.6. Подготовка проб к анализу

Сухое сырье (трава) лекарственных культур, травы и бобов сои, зерна гороха измельчают на зерновой мельнице или кофемолке, сырое сырье режут ножницами, навеску бобов (сырую) растирают в ступке.

Сырую почву растирают в ступке, а сухую просеивают через сито.

     2.7. Проведение определения

Лекарственное сырье (трава), горох (зерно).

Навеску сырой травы 50 г или сухой 10 г, зерен гороха (сухой) - 10 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл. Пробу заливают 100 и 50 мл 70% подкисленного HCl ацетона соответственно и оставляют на ночь. Экстракт фильтруют и повторяют экстракцию 2 раза по 50 и 25 мл растворителя.

Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, добавляют 50 мл дистиллированной воды, подкисляют концентрированной HSO до рН=2 и приливают 30 мл гексана. Содержимое взбалтывают в течение 2-х минут. Гексановую фракцию отбрасывают, в делительную воронку к оставшейся водно-ацетоновой фракции добавляют 30 мл хлороформа и пивот экстрагируют путем встряхивания в течение 2-х минут.

Повторяют экстракцию еще 2 раза по 25 мл. Хлороформные экстракты объединяют и переносят в делительную воронку, приливают 25 мл 50% водного раствора бикарбоната натрия, встряхивают содержимое в течение 2-х минут. После разделения слоев хлороформ отбрасывают, а в бикарбонат добавляют 1М HSO до рН=2. Жидкость перемешивают до полной дегазации.

Далее в бикарбонатный раствор добавляют 25 мл хлороформа и 10 г хлористого натрия. Воронку встряхивают. После разделения фаз хлороформный слой переносят в отгонную колбу, пропуская его через слой безводного сернокислого натрия. Повторяют экстракцию порциями хлороформа по 15 мл. Хлороформ отгоняют под вакуумом при 40°С досуха.

Сухом остаток растворяют в 0,5 мл ацетона.

Соя (трава, бобы). Навеску бобов сои 50 г сырых и 20 г сухих заливают экстрагирующей смесью (HCl 1М:НО:этанол, (1:39:60)) 100 и 50 мл соответственно и оставляют на ночь.

Навеску травы сои 50 г сырой и 50 г сухой также заливают экстрагирующей смесью и оставляют на ночь.

Экстракты фильтруют через воронку Бюхнера, промывая пробу экстрагирующей смесью дважды по 50 мл.

Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, доводят pH раствора до 1-2 и приливают 30 мл смеси гексана. Далее определение проводят так как в случае лекарственного сырья.

Почва . Навеску сырой почвы 100 г, навеску сухой почвы 50 г заливают смесью ацетона и 0,05 н CaCl (2:1) и оставляют на ночь.

Количество смеси: 100 мл в случае сырой почвы, 50 мл в случае сухой.

Экстракт фильтруют в делительную воронку. Экстракцию повторяют еще 2 раза по 50 и 25 мл растворителя. Объединенные в делительной воронке экстракты подкисляют 1М HSO до рН=2, добавляют 50 мл хлороформа и пивот экстрагируют при перемешивании в течение 2-х минут.

Далее определение вещества проводят аналогично описанному для лекарственного сырья.

Вода. 200 мл воды помещают в делительную воронку на 500 мл, подкисляют конц. HSO до рН=2. Имазетапир экстрагируют трижды по 30 мл хлороформа. Объединенные хлороформные экстракты пропускают через слой безводного сернокислого натрия. Растворитель упаривают досуха при температуре t=40°С. Остаток растворяют в 0,5 мл ацетона.

     2.8. Обработка результатов анализа

Количественное определение содержания имазетапира в пробе проводят путем сравнения площади интенсивности окраски пятен рабочей пробы и серии стандартных растворов.

Содержание имазетапира в анализируемой пробе (X), мг/кг вычисляют по формуле:

, мг/кг,

С - содержание имазетапира, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

V - общий объем раствора, мл;

V - объем аликвоты нанесенной на пластинку, мл;

Р - навеска анализируемой пробы в г.