Методические указания по определению имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле тонкослойной хроматографией

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле тонкослойной хроматографией после экстракции препарата из проб хлороформом и очистки экстракта.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения - 0,5 мкг.

Нижний предел определения:

вода - 0,001 мг/л

почва - 0,005 мг/кг

сахарная свекла - 0,01 мг/кг.

Среднее значение определения:

вода: - 99,5%

почва - 90%

сахарная свекла - 95,0%.

Суммарная погрешность определения - ±11-12%.

2.4.1. Отбор и подготовка проб

Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79 г. N 2051-79.

2.4.2. Приготовление стандартного, рабочих растворов имидоклоприда.

Стандартный раствор имидоклоприда с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески препарата (10,0 мг) в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике. Годен к употреблению в течение 30 дней.

Рабочие растворы имидоклоприда с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках, вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора.

Хранят рабочие растворы имидоклоприда в холодильнике. Годен к употреблению в течение 3-5 дней.

2.4.3. Проявляющий реактив

Готовят раствор о-толидина (16 г) в 30 мл уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и прибавляют 1 г иодида калия. После опрыскивания пластинку следует облучать УФ-светом.

2.4.4. Приготовление пластин "Силуфол".

Пластинку "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон, 25%-ный аммиак в соотношении 7:3 (об/об). Глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см. После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе.

2.5.1. Экстракция и очистка

Вода . Пробу воды (500 мл) фильтруют от механических примесей. Имидоклоприд экстрагируют хлороформом по 15-20 мл три раза.

Объединенный хлороформный экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при 55 °С досуха.

Почва . Пробу воздушно-сухой почвы просеивают через сито. Для анализа берут 100 г почвы. Экстракцию проводят хлороформом 3 раза по 50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через плотный двойной бумажный фильтр, пропускают через безводный сульфат натрия и упаривают на ротационном испарителе при 55 °С досуха.

Сахарная свекла . 50-100 г навески измельчают. Экстрагируют хлороформом 3 раза по 30-50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через плотный бумажный фильтр, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при 55,6 °С досуха.

2.5.2. Хроматографирование

Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетоне, закрывают колбу герметичной пробкой, перемешивают содержимое и 0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на подготовленную пластинку "силуфол". Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего раствора имидоклоприда, что соответствует содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.

Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда за 10-15 мин до хроматографирования наливают смесь растворителей бензол-ацетон (1:1) - смесь N 1 либо гексан-ацетон (1:1) смесь N 2 в таком количестве, чтобы глубина погружения пластинки в растворитель составила 0,5 см. После подъема фронта растворителя от линии старта на высоту 10 см хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в вытяжном шкафу до испарения растворителей, обрабатывают проявляющим реагентом и подвергают УФ-облучению в течение 1-5 мин. Пластинку помещают на расстояние 20 см от источника света. При наличии имидоклоприда на хроматограмме проявляются пятна синего цвета. Величина имидоклоприда в указанных подвижных растворителях следующая:

• бензол-ацетон (1:1) - 0,6±0,02;

• гексан-ацетон (1:1) - 0,5±0,02.

Минимально-детектируемое количество имидоклоприда - 0,5 мкг.

2.5.3. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности пятен пробы и стандартных растворов.

Концентрацию имидоклоприда в воде (мг/л) почве, сахарной свекле (мг/кг) вычисляют по формуле:

,

где - количество имидоклоприда, найденное путем сравнения со стандартами, мкг;

- навеска (объем) исследуемой пробы, г, л;

- конечный объем экстракта пробы, мл;

- хроматографируемый объем пробы, мл.