МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИМИДОКЛОПРИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, САХАРНОЙ СВЕКЛЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

УТВЕРЖДЕНО Министерством здравоохранения СССР 29 июля 1991 г. N 6154-91

Разработчики: Готлиб В.И., Рижский Мединститут.

     1. Краткая характеристика препарата

Действующее вещество имидоклоприда - 1-[6-хлоро-3-пиридинил/метил]-4, дигидро-N-нитро-Iн-имидазол-2 -амин.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: CHCINO

Молекулярная масса - 255,6

Химически чистое соединение - белое кристаллическое вещество без запаха.

Препарат растворим (20 °С) в воде - 0,58 г/л, гексане - 0,1 г/л, дихлорметане 81 г/л, 2 - пропаноле - 1,6 г/л, толуоле - 0,94 г/л.

ПДК в воде - 0,005 мг/л, ОДК в почве - 0,04 мг/кг, МДУ в сахарной свекле - не допускается.

     2. Методика определения имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле тонкослойной хроматографией после экстракции препарата из проб хлороформом и очистки экстракта.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения - 0,5 мкг.

Нижний предел определения:

вода - 0,001 мг/л

почва - 0,005 мг/кг

сахарная свекла - 0,01 мг/кг.

Среднее значение определения:

вода: - 99,5%

почва - 90%

сахарная свекла - 95,0%.

Суммарная погрешность определения - ±11-12%.

2.2. Реактивы и материалы

Имидоклоприд, 99,5% препарат, фирма "Bayer".

Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-74*.

________________

* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ 20015-88, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.

с-Толидин, ТУ 6-09-2232-75*.

________________

* ТУ, упомянутые здесь и далее по тексту, являются авторской разработкой. За дополнительной информацией обратитесь по ссылке. - Примечание изготовителя базы данных.

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Гексан, х.ч., ТУ-6-09-3375-78.

Бензол, х.ч., ГОСТ 5965-75*.

________________

* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 5955-75. - Примечание изготовителя базы данных.

Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4266-76*.

________________

* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 4166-76. - Примечание изготовителя базы данных.

Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72*.

________________

* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ 6709-72. - Примечание изготовителя базы данных.   

Пластины "Силуфол" (ЧССР).

Фильтры бумажные, "красная лента" ТУ 6-09-1678-77, диаметр 6,0-9,0 мм.

Вата гигроскопическая.

Уксусная кислота, ч.д.а., ГОСТ 61-75.

Калий иодистый, ч.д.а., ГОСТ 4232-74.

2.3. Приборы, посуда

Весы аналитические, ВЛА-200, ГОСТ 19491-74*.

________________

* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 53228-2008. - Примечание изготовителя базы данных.

Аспирационное устройство ТУ 64-1-862-77.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Холодильник бытовой.

Шкаф электрический сушильный, ТУ 64-1-1411-72.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, вместимостью 50-100 мл (для отгонки растворителя), ГОСТ 25336-82.

Холодильник, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные, цилиндры мерные пробирки, ГОСТ 1770-74.

Колбы конические плоскодонные, ГОСТ 25336-82.

Воронки лабораторные, диаметр 56 мл, ГОСТ 25336-82.

Пипетки на 1,5; 10,0 мл, ГОСТ 20292-74*.

________________

* На территории Российской Федерации документ не действует. Действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91 - ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91 - ГОСТ 29253-91, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.

Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ 25336-82.

Микропипетки на 0,1; 0,2 мл, ГОСТ 20292-74.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

Скальпель.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.

Камера для опрыскивания пластинок, ГОСТ 25336-82.

Секундомер, ГОСТ 5072-79*.

________________

* На территории Российской Федерации документ не действует. Заменен на  ТУ 25-1819.0021-90 и ТУ 25-1894.003-90, являющиеся авторской разработкой. За дополнительной информацией обратитесь по ссылке. - Примечание изготовителя базы данных.

Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ 536-280-74.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор и подготовка проб

Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79 г. N 2051-79.

2.4.2. Приготовление стандартного, рабочих растворов имидоклоприда.

Стандартный раствор имидоклоприда с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески препарата (10,0 мг) в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике. Годен к употреблению в течение 30 дней.

Рабочие растворы имидоклоприда с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках, вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора.

Хранят рабочие растворы имидоклоприда в холодильнике. Годен к употреблению в течение 3-5 дней.

2.4.3. Проявляющий реактив

Готовят раствор о-толидина (16 г) в 30 мл уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и прибавляют 1 г иодида калия. После опрыскивания пластинку следует облучать УФ-светом.

2.4.4. Приготовление пластин "Силуфол".

Пластинку "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей ацетон, 25%-ный аммиак в соотношении 7:3 (об/об). Глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см. После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Экстракция и очистка

Вода . Пробу воды (500 мл) фильтруют от механических примесей. Имидоклоприд экстрагируют хлороформом по 15-20 мл три раза.

Объединенный хлороформный экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при 55 °С досуха.

Почва . Пробу воздушно-сухой почвы просеивают через сито. Для анализа берут 100 г почвы. Экстракцию проводят хлороформом 3 раза по 50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через плотный двойной бумажный фильтр, пропускают через безводный сульфат натрия и упаривают на ротационном испарителе при 55 °С досуха.

Сахарная свекла . 50-100 г навески измельчают. Экстрагируют хлороформом 3 раза по 30-50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через плотный бумажный фильтр, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при 55,6 °С досуха.

2.5.2. Хроматографирование

Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетоне, закрывают колбу герметичной пробкой, перемешивают содержимое и 0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на подготовленную пластинку "силуфол". Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего раствора имидоклоприда, что соответствует содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.

Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда за 10-15 мин до хроматографирования наливают смесь растворителей бензол-ацетон (1:1) - смесь N 1 либо гексан-ацетон (1:1) смесь N 2 в таком количестве, чтобы глубина погружения пластинки в растворитель составила 0,5 см. После подъема фронта растворителя от линии старта на высоту 10 см хроматографирование прекращают. Пластинку выдерживают в вытяжном шкафу до испарения растворителей, обрабатывают проявляющим реагентом и подвергают УФ-облучению в течение 1-5 мин. Пластинку помещают на расстояние 20 см от источника света. При наличии имидоклоприда на хроматограмме проявляются пятна синего цвета. Величина имидоклоприда в указанных подвижных растворителях следующая:

  • бензол-ацетон (1:1) - 0,6±0,02;

  • гексан-ацетон (1:1) - 0,5±0,02.

Минимально-детектируемое количество имидоклоприда - 0,5 мкг.

2.5.3. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности пятен пробы и стандартных растворов.

Концентрацию имидоклоприда в воде (мг/л) почве, сахарной свекле (мг/кг) вычисляют по формуле:

,

где - количество имидоклоприда, найденное путем сравнения со стандартами, мкг;

- навеска (объем) исследуемой пробы, г, л;

- конечный объем экстракта пробы, мл;

- хроматографируемый объем пробы, мл.

     3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях. При работе с ядовитыми и взрывчатыми веществами реакции следует проводить только в вытяжном шкафу, строго соблюдая правила производственной санитарии и личной гигиены.