Ускоренное определение ДДТ в пищевых продуктах

Ускоренное определение ДДТ в пищевых продуктах*

________________

* Л.А.Стемпковская, В.И.Волкова (Киевский НИИ гигиены питания).

Извлечение пестицида. Овощи, фрукты. 25 г продукта измельчают*, помещают в колбу с притертой пробкой и экстрагируют** 25-50 мл (объем измерить точно) петролейного эфира ( 40-60)*** при энергичном взбалтывании 30-40 мин. Экстракт сливают, измеряют его объем и при необходимости фильтруют. Остатки экстракта с фильтра тщательно смывают растворителем, смывы присоединяют к основному раствору.

________________

* Зерно не измельчают. При анализе яблок следует использовать только кожуру толщиной 3-4 мм.     

** К картофелю перед экстрагированием добавить 15-20 г свежепрокаленного безводного NaSO.     

*** При анализе корне- и клубнеплодов в качестве растворителя, кроме петролейного эфира, может быть использован -гексан.

Молоко. 50 мл молока упаривают в фарфоровой чашке при периодическом помешивании палочкой на кипящей водяной бане до получения творогообразной массы, прибавляют 40-50 г безводного свежепрокаленного NaSO. Экстрагируют ДДТ трижды по 5 мин петролейным эфиром порциями по 40 мл, тщательно перемешивая и растирая пробу стеклянной палочкой с расплюснутым концом (в виде пестика). Остаток промывают петролейным эфиром (30-40 мл), экстракты объединяют.

Кефир, сметана, творог. Пробу продукта массой 25 г помещают в химический стаканчик вместимостью 100-200 мл, прибавляют 1-3 чайных ложки безводного сернокислого натрия (для полного высушивания пробы). Экстрагируют ДДТ трижды по 5 мин петролейным эфиром порциями по 30 мл, тщательно перемешивая пробу стеклянной палочкой. Остаток промывают 30-50 мл петролейного эфира, экстракты объединяют.

Масло, жир. Пробу продукта массой 20-25 г помещают в коническую колбу, растапливают на водяной бане и растворяют в 150 мл петролейного эфира.

Мясо и рыба. Тщательно измельченную на мясорубке пробу продукта массой 25 г помещают в химический стакан вместимостью 100-200 мл. Экстрагируют ДДТ трижды по 5 мин петролейным эфиром порциями по 30 мл, тщательно перемешивая пробу стеклянной палочкой. Остаток промывают 30-50 мл петролейного эфира, экстракты объединяют.

Очистка экстрактов. Морковь, свекла, картофель. Из объединенного экстракта отгоняют петролейный эфир.

Капуста, огурцы, зерно пшеницы. Экстракт хроматографируют через слой окиси алюминия высотой 5-6 см, предварительно промытый 20-25 мл петролейного эфира. После хроматографирования адсорбент снова промывают 20-25 мл растворителя, фильтраты объединяют и отгоняют петролейный эфир досуха.

Яблоки. Из экстракта удаляют растворитель. ДДТ из сухого остатка извлекают 25 мл ацетона, внося последний в колбочку дробно, по 5-6 мл. Объединенный ацетоновый экстракт хроматографируют через слой активированного угля высотой 3-5 см, предварительно промытый 20-25 мл ацетона. После хроматографирования адсорбент промывают 40-50 мл ацетона, фильтраты объединяют и отгоняют растворитель на водяной бане досуха.

Молоко, кефир, сметана, творог, мясо и рыба. К полученному экстракту добавляют 20 мл серной кислоты плотностью 1,82-1,84 г/см, осторожно перемешивают жидкость легкими круговыми движениями в течение 2-3 мин. После разделения фаз эфирный слой сливают в чистую колбу через ватный фильтр. Остаток трижды промывают петролейным эфиром порциями по 40 мл, смывы присоединяют к основному раствору, отгоняют растворитель в приборе до объема 40-50 мл. Полученный раствор количественно переносят в коническую колбу вместимостью 200 мл с 20 г смеси адсорбентов (10 г влажностью 10% и 10 г влажностью 15%). Адсорбенты предварительно промывают 3-4 раза петролейным эфиром. Содержимое колбы взбалтывают 3-5 мин. После оседания адсорбентов раствор сливают, дважды промывают адсорбенты петролейным эфиром (по 25-20 мл), смывы присоединяют к основному раствору и отгоняют растворитель досуха.

Жир, масло. К полученному раствору масла (жира) в петролейном эфире прибавляют 20 мл серной кислоты плотностью 1,82-1,84. Осторожно плавными круговыми движениями перемешивают содержимое колбы 2-3 мин и после резкого разделения фаз (примерно через 10 мин) эфирный слой сливают в чистую колбу через ватный фильтр. Остаток в колбе промывают трижды петролейным эфиром по 30-40 мл, смывы присоединяют к основному раствору, добавляют снова 20 мл серной кислоты и повторяют вышеуказанную процедуру. Эфир из экстракта отгоняют в приборе до объема 40-50 мл.

Полученный раствор количественно переносят в коническую колбу с 20 г смеси адсорбентов (10 г влажностью 10% и 10 г влажностью 15%), предварительно промытых 3-4 раза петролейным эфиром. Колбу взбалтывают 3-5 мин и после оседания адсорбентов раствор сливают. Адсорбенты дважды промывают петролейным эфиром (по 15-20 мл), смывы присоединяют к основному раствору, растворитель отгоняют досуха.

Нитрование и колориметрирование. К охлажденному сухому остатку приливают 2 мл охлажденной в холодильнике нитрующей смеси. Содержимое колбы перемешивают, затем колбу погружают на 10-15 мин в кипящую водяную баню (периодически колбу встряхивают). После нитрования в остывший нитропродукт вносят 5 мл ледяной воды и хорошо взбалтывают. Содержимое колбы переносят в делительную воронку вместимостью 25-30 мл. Колбу трижды ополаскивают ледяной водой примерно по 2 мл и сливают смывы в делительную воронку. Из воды нитропродукт экстрагируют 4 мл бензола и течение 1-2 мин. После разделения слоев воду сливают через кран. Стенки делительной воронки омывают оставшимся в ней бензолом*, тщательно удаляют остатки воды и через горлышко воронки бензол переносят в круглодонную колбу вместимостью 25-30 мл.

________________

* Если бензольный раствор имеет желтоватый цвет, его быстро промывают 2-3 раза 5%-ным раствором NaOH порциями 1,5-2 мл. После промывки тщательно удаляют остатки щелочного раствора.

Делительную воронку ополаскивают 1 мл бензола, который присоединяют к основному раствору, добавляют 2 мл этанольного раствора едкого кали, перемешивают и через 5-8 мин измеряют оптическую плотность окрашенного раствора на фотоэлектроколориметре ФЭК-М при зеленом светофильтре (582 мм) в кювете с толщиной слоя 10 мм. Для сравнения используют бензол.

Оценку полученных результатов проводят по калибровочной кривой, для построения которой берут от 0,1 до 1 мл стандартного раствора ДДТ в этаноле (100 мкг/мл), удаляют растворитель, к сухому остатку добавляют 2 мл нитрующей смеси и далее проводят анализ, как описано выше.

Содержание ДДТ в пробе может быть определено с достаточной для практических целей точностью также путем сравнения полученного окрашенного раствора со стандартной (имитационной) шкалой, построенной на основе водных растворов хлорной меди и кристаллвиолета. Для 100 мкг ДДТ характерна окраска, которая имитируется раствором, состоящим из 3 мл 3%-го , 0,6 мл 0,0025%-го кристаллвиолета и 6,4 мл дистиллированной воды. Путем разбавления данного раствора получают растворы, отвечающие меньшим количествам ДДТ (10, 20, 30... мкг).

Расчет. Содержание ДДТ в продукте (, мг/кг) вычисляют по формулам: (первая для продуктов растительного происхождения, вторая для продуктов животного происхождения):

и ,

где - количество ДДТ, найденное по калибровочному графику или стандартной шкале, мкг;

- масса (объем) пробы, г/мл;

- объем экстрагента, мл;

- объем взятого в анализ экстракта, мл.

Сборник методических документов,
необходимых для обеспечения применения
Федерального закона от 12.06.08 N 88-ФЗ
"Технический регламент на молоко
и молочную продукцию". Часть 7. -
М.: Федеральный центр гигиены
и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009